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摘要：目的 建立4300紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)撿剝血中碳氧血紅蛋白含量方

法快速診斷一氧化碳(CO)中毒，方法檢血用0 1％Na₂CO₃稀釋?zhuān)尤脒B二亞硫酸鈉．4300紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定500 nm～600nm吸收光譜和538nm和555nm處吸光度值，確定碳氧血紅蛋白，計(jì)算碳氧血紅蛋白含量。

結(jié)果 氧和血紅蛋白的zui大吸收波長(zhǎng)為555 nm，碳氧血紅蛋白的zui大吸收波長(zhǎng)為538 nm和555 nm。4300紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)血中碳氧血紅蛋白含量(10％～90％)回收率平均為95％一l10％．標(biāo)準(zhǔn)差為2.1％-8. 0％，zui低檢出農(nóng)度為2％：

80例可疑CO中毒者中63例血中檢出碳氧血紅蛋白，平均含量為35％。

168倒可疑CO中毒死亡者中124例血中檢出碳氧血紅蛋白。

結(jié)論4300紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)血中碳氧血紅蛋白，具有快速、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠的特點(diǎn)，可應(yīng)用于CO中毒的診斷和CO中毒死亡的法醫(yī)學(xué)鑒定。

關(guān)鍵詞：一氧化碳中毒；碳氧血紅蛋白；4300紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

1資料與方法

1.1藥品和試劑：連二亞硫酸鈉、肝索鈉均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2主要儀器：4300紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，掃描渡長(zhǎng)范圍(200--700)nm。

1.3標(biāo)本采集：可疑CO中毒病人，肘靜脈采血(5～10)mL，加入肝素化試管中，試管上部不留空問(wèn)，密封，立即送檢。

1.4碳氧血紅蛋白定性定量檢驗(yàn)：檢血40uL，加入1 0mL0 1％Na₂CO₃溶液，4300紫外分光光度計(jì)測(cè)定(500--600)nm吸收光譜及538nm和555nm處吸光度值(和A₅₅₅)。根據(jù)吸收光譜形狀和zui大吸收波長(zhǎng)確定有無(wú)碳氧血紅蛋白，按公式COHb％=A₅₃₈÷A5₅₅÷0 458 -1.692計(jì)算血中碳氧血紅蛋白含量。

2結(jié)果

2.1 碳氧血紅蛋白光譜掃描圖

取新鮮肝素鈉抗凝人血100mL_通人CO飽和(2-3)h，充分飽和，使碳氧血紅蛋白含量達(dá)100％。配制不同碳氧血紅蛋白含量的系列血液樣品，按上述方法操作和扣描，得到不同碳氧血紅蛋白含量血液的光譜掃描。

2.2 血中碳氧血紅蛋白含量檢測(cè)回收率

用空白血和CO充分飽和血(碳氧血紅蛋白含量為100％)配制不同碳氧血紅蛋白含量(10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％)的系列血液樣品，每個(gè)濃度血樣按前述方法取5份檢測(cè)氧血紅蛋白含量。詳見(jiàn)表1

2.3 中毒病人檢測(cè)

選擇2005年1月1日-2005年12月30日山西醫(yī)科大學(xué)*醫(yī)院急診科、山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院急診科、山西省人民醫(yī)院急診科所送可疑CO中毒病人80例，其血中碳氧血紅蛋白含量檢測(cè)結(jié)果。共檢驗(yàn)80例，槍出COHb者63例，未榆出COHb者17例，COHb含量35％，檢出含量25％～65％。

2 4 CO中毒死亡者檢測(cè)

2005年1月1日-2005年12月30日山西省范圍內(nèi)部分可疑CO中毒死亡案例檢測(cè)結(jié)果。共檢驗(yàn)168例，未檢出COHb者44例(26.2％)，檢出COHb者124例(73.8％)，COHb含量9.0％-70.6％，其中<10％例(0.08％)，10％～20％6例(4.80％)，20％～30％8例(6.45％)，30％～40％i例(0.08％)．40％～50％9例(7.25％)，(50％～60％)，51例(41 1％)，61％～70％35例(28 20％)，>70％13例(10.50％)。

3討論

3.1血中碳氧血紅蛋白檢測(cè)

建立血中碳氧血紅蛋白的4300紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)方法，光譜掃描和吸光度值可同時(shí)進(jìn)行，整個(gè)檢驗(yàn)可在10 min內(nèi)完成。與化學(xué)法和氯化鈀試驗(yàn)法相比，具有操作簡(jiǎn)便、耗時(shí)短、成本低等優(yōu)點(diǎn)，檢測(cè)靈敏度、回收率均達(dá)到生物檢驗(yàn)內(nèi)毒物檢測(cè)的要求，可應(yīng)用于CO中毒的診斷和CO中毒的法醫(yī)學(xué)鑒定。

3.2中毒病人檢測(cè)

臨床CO中毒癥狀和體征比較明顯，病史結(jié)臺(tái)臨床癥狀診斷準(zhǔn)確度較高。本研究巾臨床診斷80例可疑cO中毒病人55例血中檢出COHb。但中毒程度的判定，尤其懷疑合并用藥或病史不清伴有昏迷時(shí)COHb定量檢測(cè)很有必要。所檢血中COHb含量zui高的昏迷病人血中COHb達(dá)65％，10 mm內(nèi)檢驗(yàn)完畢，依照檢驗(yàn)結(jié)果很快進(jìn)釘高壓氧艙治療，24 h后病人意識(shí)恢復(fù)，各種生命體征恢復(fù)正常。

3.3 CO中毒死亡案例檢測(cè)

一般認(rèn)為，CO中毒死亡者血中碳氧血紅蛋白含量多達(dá)60％～80％。2005年山西省部分CO中毒死亡案例死者血中COHb檢出情況顯示，26.2％中未檢出COHb，73．.8％檢出COHb。后者(124例)中COHb含量大于60％者占38．72％，50％～60％者占4l.1％，40％～50％者占7.25％，小于40％者占12 9％，而在大于50％的99例血中均未檢出其他毒物，故認(rèn)為血中碳氧血紅蛋白含量大于50％，排除其他毒物即可診斷為CO中毒死亡。