郁李仁為薔薇科植物郁李、歐李、榆葉梅、長(zhǎng)梗扁桃等的種仁。郁李仁種子含苦杏仁甙，苦杏仁苷一般指維生素B17。它在化學(xué)上是兩種糖分子，即苯甲醛(benzaldehyde)和氰化物(cyanide)的化合物，作為藥劑，又稱Nitrilosides?？嘈尤受湛商禺愋缘匾种瓢㈦逅卵巧?作用強(qiáng)度與血液中苦杏仁苷濃度有關(guān)?？嘈尤受者€具有抗凝血作用。

傳統(tǒng)采用采用銀量法測(cè)定，但銀量法屬于間接測(cè)定方法，影響因素多，目前采用其他方法對(duì)郁李仁進(jìn)行含量測(cè)定的報(bào)道較少。使用液相色譜儀直接測(cè)定郁李仁中苦杏仁苷的含量，方法準(zhǔn)確、可靠，為郁李仁中苦杏仁苷的含量測(cè)定提供了依據(jù)和參考。

一、儀器與試藥

1儀器：

Waters液相色譜儀，Waters2487紫外檢測(cè)器，ZW色譜柱，恒溫箱，Empower色譜工作站，Agilent手動(dòng)進(jìn)樣器（20μL）；十萬分之一電子分析天平，Cary60紫外分光光度計(jì)。

 waters液相色譜儀HPLC

1.2試藥：

苦杏仁苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110820-200403）；郁李仁藥材，經(jīng)鑒定分別為薔薇科植物郁李和長(zhǎng)柄扁桃的干燥成熟種子。乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

二、方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱：SupelcoODSC18（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（20∶80）；柱溫：25℃；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm，進(jìn)樣量：20μL。

2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥12h的苦杏仁苷對(duì)照品42.32mg，置10mL量瓶中，用70%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得苦杏仁苷4.232mg/mL的對(duì)照品溶液。

2.3供試品溶液的制備取郁李仁粗粉0.3g， 精密稱定，置具塞三角燒瓶中，加石油醚（60～90℃）50mL，回流提取1h，過濾，以石油醚分3次洗滌濾渣及容器，每次10mL，棄去石油醚液，濾紙 及濾渣揮干溶劑，置原容器中，精密加入70%甲醇溶液50mL，精密稱定，回流提取1h，放冷至室溫，再稱重，用70%甲醇補(bǔ)足失重，抽濾，精密量取續(xù)濾 液5mL置10mL量瓶中，以70%甲醇稀釋至刻度，以0.45μm濾膜濾過，取續(xù)濾液即得。

2.4線性關(guān)系考察精密量取苦杏仁苷對(duì)照品溶液1mL置10mL量瓶中，用70%甲醇稀釋至刻度，再依次稀釋，制得含苦杏仁苷211.6、105.8、52.9、26.45、13.225、6.6125、3.30625μg/mL的對(duì)照品溶液。分別精密吸取各20μL進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積積分值對(duì)濃度進(jìn)行回歸分析，得苦杏仁苷回歸方程為：Y＝22645X＋10860，r＝1.0000；苦杏仁苷線性范圍為0.06613～4.232μg。

2.5精密度試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得苦杏仁苷峰面積積分值的RSD＝0.86%。

2.6重復(fù)性試驗(yàn)取同一批次樣品6份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果苦杏仁苷的平均含量為3.16%，RSD＝1.35%。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液于配制后0、2、4、6、8、10、24h測(cè)定，計(jì)算峰面積RSD＝1.11%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8加樣回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的同一批次（批號(hào)080121）郁李仁粉末6份，每份約0.15g，脫脂后分別精密加入4.232mg/mL的苦杏仁苷對(duì)照品溶液1mL，依法制備供試品溶液并測(cè)定。

2.9樣品含量測(cè)定分別測(cè)定了小李仁、大李仁藥材各3批，采用外標(biāo)法計(jì)算苦杏仁苷的含量，結(jié)果符合要求。

注意：由于郁李仁中含有大量的油脂，如不除去測(cè)定時(shí)易引起干擾，且連續(xù)測(cè)定含油脂樣品還可能引起色譜柱柱效降低，故提取前應(yīng)先脫脂，采用該儀器操作方便，結(jié)果準(zhǔn)確準(zhǔn)確、可靠，可用于郁李仁中苦杏仁苷的含量測(cè)定。