紅花籽油富含不飽和脂肪酸及維生素E,其中,亞油酸含量高達73%--85%,被稱為“亞油酸王”,是已知植物油中含量zui高的油脂。亞油酸 CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CH(CH2)7COOH,不飽和脂肪酸的一種。為以甘油酯形態(tài)構(gòu)成的亞麻仁油、棉籽油之類的干性油、半干性油的主要成分。目前,亞油酸提取本文采用氣相色譜法,對市售的兩個品牌亞油酸含量用不同的試樣方法進行了測定。國標zui低標準紅花籽油中亞油酸的含量≥67.8%。其作用如下:
1. 亞油酸是細胞的組成成分,特別是參與線粒體及細胞膜磷質(zhì)的合成。亞油酸缺乏可能導(dǎo)致線粒體腫脹,細胞膜機構(gòu)、功能的改變,膜透性、脆性增加。
2. 亞油酸與脂質(zhì)代謝關(guān)系密切。體內(nèi)的膽固醇要與脂肪酸結(jié)合才能在體內(nèi)轉(zhuǎn)送進行正常代謝。亞油酸缺乏后,膽固醇轉(zhuǎn)送受阻不能進行正常代謝,就會在體內(nèi)沉積,zui終導(dǎo)致疾病。
3. 亞油酸是合成前列素的必須前提,體內(nèi)缺乏亞油酸,組織形成前列素的能力就會減退。亞油酸還會對由于X射線引起的一些皮膚損傷有保護作用。
4. 紅花籽油不但能夠預(yù)防心腦血管疾病,還有治療脂肪肝的奇特功效。
5. 亞油酸的另一個功效就是組成細胞膜的原材料。組成細胞膜的材料就是不飽和脂肪酸。亞油酸有強化新陳代謝,增強細胞活力的功能。
1 實驗部分
1.1 試劑和儀器
1.1.1 0.4mol/L氫氧化鉀—甲醇溶液:稱2.24g氫氧化鉀溶于少許甲醇中,然后用甲醇稀釋到10ml。
1.1.2 石油醚(30~60℃沸程)和苯的混合溶劑(1:1)。
1.1.3 正己烷和乙迷的混合溶劑(2:1)
1.1.4 日本島津GC2010plus氣相色譜儀,配FID檢測器,GCsolution分析軟件
1.2 試樣的甲酯化處理方法
1.2.1方法1:取試樣30--100mg(約2-6滴)于10ml容量瓶中,加入2ml石油醚和苯的混合溶劑(1:1)使試樣溶解,再加入 2ml0.4mol/L氫氧化鉀—甲醇溶液,混勻,靜置10min,加水定容1-2ml振搖,放置上液澄清,加水至刻度,若上液澄清渾濁,可滴加幾滴無水 乙醇1-2min即可澄清,上層液即可用于氣相色譜分析[1]。
1.2.2方法2:取試樣30--100mg(約2-6滴)于10ml容量瓶中,加入2ml正己烷和乙迷的混合溶劑(2:1)振蕩使試樣溶解,再加 入2ml0.4mol/L氫氧化鉀—甲醇溶液,混勻,靜置10min,加水定容1-2ml振搖,放置上液澄清,加水至刻度,取上清液用于氣相色譜分析。
1.3分析測定
1.3.1儀器工作條件色譜柱:分離柱采用交聯(lián)TR—WAX (30m×0.25mmID×0.5mm)毛細管色譜柱;分流進樣,載氣:N2,線速度80cm/min;分流進樣,分流比:5:95汽化室溫度:230℃;柱室溫度:210℃恒溫;檢測器:FID,230℃;進樣量:1μL。
1.3.2定性和定量測定:本法采用脂肪酸甲酯標準品與試樣色譜峰的保留時間進行比較定性。定量分析采用面積歸一化法,在色譜分析軟件上利用時間程序?qū)⑷軇┓宓姆迕娣e扣除,直接計算出亞油酸在脂肪酸總量中所占的重量百分比。色譜圖見附圖。
附圖2 色譜分離圖用正己烷-**(2:1)混合溶劑溶液紅花油a
2 氣相色譜儀測定紅花籽油中亞油酸結(jié)果與討論
2.1 對市售2種紅花籽油中的亞油酸的含量進行測定,結(jié)果見附表1。
附表1 紅花籽油中亞油酸含量測定結(jié)果及方法變異系數(shù)
樣品 | 塔原紅花紅花籽油 | 塔緣紅花籽油 | ||||
方法 | 石油醚—苯(1:1) | 正己烷—**(2:1) | 國標推薦方法 | 石油醚—苯(1:1) | 正己烷—**(2:1) | 國標推薦方法 |
測定結(jié)果(%) | 79.122 | 79.119 | 78.452 | 81.656 | 81.766 | 80.864 |
79.152 | 79.242 | 78.412 | 81.654 | 81.745 | 80.541 | |
79.194 | 79.214 | 78.399 | 81.542 | 81.542 | 80.654 | |
79.154 | 79.22 | 78.421 | 81.948 | 81.528 | 80.421 | |
79.191 | 79.201 | 78.433 | 81.654 | 81.354 | 80.547 | |
平均值 | 79.163 | 79.199 | 78.423 | 81.691 | 81.587 | 80.605 |
標準偏差 | 0.03 | 0.047 | 0.02 | 0.152 | 0.171 | 0.166 |
變異系數(shù) | 0.04% | 0.06% | 0.03% | 0.19% | 0.21% | 0.21% |
由附表1中實驗數(shù)據(jù)可見方法1和方法2與國家標推薦方法結(jié)果差異不大,變異系數(shù)均<5%,且同一樣品用以上三種方法酯化,反復(fù)試驗,變異系數(shù)均<5%
2.2由于有機酸一般極性性較強,亞油酸含碳高,沸點高,所對它們必須甲酯化轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的酯,以增加其揮發(fā)性,才可進行色譜分析。本文采用的石油醚 —苯(1:1)氫氧化鉀—甲醇室溫酯化法和正己烷—**(2:1) 氫氧化鉀—甲醇室溫酯化法,測定結(jié)果差異不大,與國家標推薦方法比較zui大優(yōu)點是簡便、快速、結(jié)果準確、穩(wěn)定性較好。
2.3本文采用的石油醚—苯(1:1)氫氧化鉀—甲醇室溫酯化法和正己烷—**(2:1) 氫氧化鉀—甲醇室溫酯化法,測定結(jié)果比國家標推薦方法結(jié)果偏大的原因可能是某些脂肪酸未*酯化而導(dǎo)致的,但不影響zui終結(jié)果的報出。