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液相色譜儀測定雪糕中的合成色素
更新時間:2018-01-16   點擊次數(shù):1986次

合成色素主要指用人工合成的方法從煤焦油中制取或以苯、甲苯、萘等芳香烴化合物為原料合成的有機色素,不但能改善食品色澤,且成本低廉、著色力強, 被廣泛應用于食品中。WHO和我國對目前允許使用的合成色素均進行了嚴格的毒性試驗,并分別制定出他們的每日允許攝入量(ADI值)。人工合成色素應用非常廣泛。長期食用人工合成色素將會在體內(nèi)蓄積,對腎臟、肝臟產(chǎn)生一定的傷害。

1材料與方法

1.1儀器及色譜檢測條件

Agilent1100液相色譜儀(附紫外檢測器);AgilentC18色譜柱(416mm×250mm)。流動相:甲醇:乙酸銨溶液((pH=4,0102mol/L);梯度洗脫:甲醇:20%~98%,12min;紫外檢測:254nm波長;流速:110mL/min;柱溫:30°C;進樣量:20μL。

 

1.2試劑

人工合成色素胭脂紅、檸檬黃、日落黃、亮藍配成1100mg/mL的混合色素標準儲備液;硫酸銅、氫氧化鈉、乙酸鋅、亞鐵氰化甲、檸檬酸、甲酸、乙醇、氨水、乙酸、乙酸銨為分析純;甲醇為色譜純;聚酰胺粉(200目);雪糕樣品(市售)。

1.3堿性硫酸銅預處理

準確稱取試樣15100g,加入蒸餾水30mL使樣品融化稀釋,再加入20mL硫酸銅溶液(100g/L)及414mL氫氧化  鈉溶液(40g/L),定容至100mL,混勻,沉淀,靜置30min,過濾,收集濾液,備用。

1.4乙酸鋅-亞鐵氰化預處理

準確稱取試樣15100g,加入蒸餾水30mL使樣品融化稀釋,再加入乙酸鋅溶液(稱取2119g乙酸鋅,加入3mL冰乙酸,定容至100mL)和亞鐵***溶液(1019g/100mL)各5mL定容至100mL,混勻,沉淀,靜置30min,過濾,收集濾液,備用。

1.5色素提取

將濾液用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)至pH=6,水浴加熱至60°C。將3g聚酰胺粉倒入加熱后的樣液中充分攪拌,以G3垂融漏斗抽濾。用60°C、pH=4的水(將蒸餾水用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)至pH=4)洗滌3~5次,再用甲醇-甲酸混合溶液洗滌3~5次,zui后用蒸餾水洗滌至中性。用無水乙醇-氨水-水(7+2+1)混合溶液作為解吸液解吸3~5次,每次5mL,收集解吸液,加乙酸調(diào)節(jié)pH=7。70°C水浴加熱揮發(fā)有機溶劑至近干,加水定容至10mL,經(jīng)0145μm濾膜過濾,待測。

1.6加標樣品的制備

準確稱取合成色素本底值為零的雪糕樣品15100g,加入一定量的人工合成色素標準品,混合均勻即為加標樣品。

2液相色譜儀測定雪糕中的合成色素的結(jié)果與分析

2.1標準曲線及線性范圍

混合色素標準儲備液配制成110、510、1010、2010、5010μg/mL的標準系列,HPLC法檢測得到標準色譜圖(圖1)。以峰面積為縱坐標y(mAu3s),濃度為橫坐標x(μg/mL),得到四種人工合成色素標準曲線方程和R2值如下:檸檬黃y=621266x-311549,R2=019993;胭脂紅y=401390x+214743,R2=019998;日落黃y=531541x-317724,R2=019998;亮藍y=1851520x+121727,R2=019995。標準系列在110~5010μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.2加標回收率及精密度

對加標樣品分別按堿性硫酸銅預處理法和乙酸鋅-亞鐵氰化預處理法進行操作,重復三次,結(jié)果如表2所示。

2.3樣品測定

稱取某品牌菠蘿味雪糕樣品15100g,按乙酸鋅-亞鐵氰化法處理雪糕樣品,并提取人工合成色素,按上述色譜條件測定,平行試驗3次。檢測結(jié)果如圖2所示,表明樣品中含有檸檬黃色素。

三次平行試驗的測定值如表3所示。根據(jù)《食品添加劑使用衛(wèi)生標準》中的規(guī)定,檸檬黃色素在冷凍飲品中zui大使用量為0105g/kg[5],即50mg/kg。可見,該樣品中檸檬黃的含量遠低于*值。

3液相色譜儀測定雪糕中的合成色素的結(jié)論

用堿性硫酸銅法處理的樣品精密度良好,但準確度較差。用乙酸鋅-亞鐵氰化法處理的雪糕樣品加標回收率較高,準確度和精密度良好。用乙酸鋅-亞鐵氰化預處理法進行樣品測定,準確度較好。

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